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酶聯(lián)講解:制備培育基的基礎(chǔ)方法
更新時(shí)間:2019-12-23   點(diǎn)擊次數(shù):1045次

1、培育基pH的初步調(diào)正
 因培育基在加熱消du過(guò)程中、pH會(huì)有所改變,培育基各成分*溶解后,應(yīng)進(jìn)行PH的初步調(diào)正。例如,牛肉浸液約可降低pH0.2,而腸浸液pH卻會(huì)有明顯的升高。因而,對(duì)這個(gè)過(guò)程,操作者應(yīng)隨時(shí)留意探究經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培育基的終PH,確保培育基的質(zhì)量。PH調(diào)整后,還應(yīng)將培育基煮沸數(shù)分鐘,以利培育基沉淀物的析出。

2、培育基的過(guò)濾弄清
液體培育基必須弄清,瓊脂培育基也應(yīng)通明無(wú)明顯沉淀,因而,需要采用過(guò)濾或其它弄清方法以到達(dá)此項(xiàng)要求。一般液體培育基可用濾紙過(guò)濾法,濾紙應(yīng)折疊成折扇或漏斗形,以防止因液壓不均勻而引起濾紙破裂。

3、可用清潔的白色薄絨布過(guò)濾:
亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過(guò)濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時(shí)、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙重復(fù)過(guò)濾。如過(guò)濾法不能到達(dá)弄清要求、則須用蛋清弄清法。即將冷卻至55~60°C的培育基放入大的三角燒瓶?jī)?nèi),裝入量不得超越燒瓶容量的1/2,每1000ml培育基參加1~2個(gè)雞蛋的蛋白,強(qiáng)力振搖3~5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121°C加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過(guò)濾即可。

4、培育基的分裝
培育基的分裝,應(yīng)按運(yùn)用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等恰當(dāng)容器內(nèi)。分裝量不得超越容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時(shí)hao能運(yùn)用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培育基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng)。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗潔凈并經(jīng)干烤消du,以利于培育基的*滅菌。每批培育基應(yīng)別的分裝20ml培育根據(jù)一小玻璃瓶中,隨該批培育基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培育基終pH之用。

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