細(xì)胞凋亡過(guò)程中細(xì)胞核染色質(zhì)的形狀學(xué)改動(dòng)分為三期:
1,Ⅰ期的細(xì)胞核呈波紋狀(rippled)或呈折縫樣(creased),部分染色質(zhì)呈現(xiàn)濃縮狀態(tài);
2,Ⅱa期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝集、邊緣化;
3,Ⅱb期的細(xì)胞核裂解為碎塊,發(fā)生凋亡小體
細(xì)胞凋亡的檢測(cè)辦法
1.確認(rèn)有無(wú)凋亡可用Annexin v-PI 雙染,因?yàn)樵撧k法對(duì)前期凋亡比較敏感,假如沒(méi)測(cè)出明顯的凋亡,換其他也或許測(cè)不出。
2.用Annexin v-PI 雙染測(cè)出凋亡后,可根據(jù)標(biāo)本或樣品情況挑選其它的辦法來(lái)驗(yàn)證,很多高質(zhì)量的paper也只用一種辦法測(cè)凋亡。當(dāng)然也要根據(jù)下一步的試驗(yàn)需求,假如想進(jìn)一步確認(rèn)該凋亡是線粒體途徑仍是逝世受體途徑,能夠檢測(cè)相應(yīng)的caspase或挑選線粒體途徑的試劑盒等等。
3.zui簡(jiǎn)略的是形狀學(xué)的檢測(cè),Hoechst染色,用熒光顯微鏡觀察,加上假如凋亡形狀好,出的圖畫(huà)也美麗,周期也短,很直接就能夠看到結(jié)果。還有我們都挑選的是DNAladder,過(guò)程是很簡(jiǎn)略,不過(guò)要想真的做出美麗的LADDER或許還需求下不少的功夫,還有一種是流式細(xì)胞來(lái)檢測(cè),也不算貴,這三種應(yīng)該都是用的非常多的。