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　　我們在ELISA實驗中經(jīng)常會碰到試劑盒變質(zhì)的問題，那么是什么原因?qū)е铝?strong>ELISA試劑盒質(zhì)保呢？一旦變質(zhì)對我們的實驗又會有什么影響呢？
 

　　導致ELISA試劑盒變質(zhì)的原因主要分為七種：
 

　　1、方法學的影響
 

　　ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的bu公平競爭等因素的影響，結(jié)果重復性較差，質(zhì)量較難控制。
 

　　2、試劑因素
 

　　不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。 嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復雜過程，并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性；對于效期短、使用率低的試劑，應當小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反復凍融造成試劑的失效。
 

       3、樣本因素

 

　　標本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素，前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包括標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。
 

　　4、操作因素
 

　　ELISA操作步驟復雜，操作不當將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。
 

　　5、灰區(qū)的設置
 

　　通常情況下，ELISA定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結(jié)果，兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”(cut-off value，CO值)，這是定性免疫測定結(jié)果報告的依據(jù)。
 

　　6、標本復查
 

　　ELISA手工檢測過程復雜，影響因素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異，因此加大復查力度是保證結(jié)果準確性的可靠方法，比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結(jié)果進行復查。
 

　　7、常表示結(jié)果的常用方法
 

　?、?定性測定。
 

　?、?半定量測定 結(jié)果一般以滴度表示。
 

　?、?定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定，繪制標準曲線，結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線。
 

　　只要我們注意以上七種情況，ELISA試劑盒變質(zhì)的原因就基本上也不會存在了，如果你還有其他關于ELISA試劑盒方面的疑問歡迎隨時咨詢我們的客服人員。