1. 常用的保溫方式
保溫的方式除有的 ELISA 儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴。將 ELISA 試劑盒板置于水浴箱中時(shí),ELISA 板底應(yīng)貼著水面,這樣能使溫度迅速平衡。水浴保溫的優(yōu)勢在于能較好地解決因受熱不均衡所致的周圍孔與中央孔結(jié)果的吸光度差異,也就是 “邊緣效應(yīng)"。
2. 避免蒸發(fā)的方法
為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。這樣既能防止水分蒸發(fā)影響反應(yīng)體系的濃度,又能保證反應(yīng)在相對穩(wěn)定的環(huán)境中進(jìn)行。若用保溫箱,ELISA 試劑盒應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,最后將 ELISA 板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此,以確保反應(yīng)板能夠迅速達(dá)到所需的溫度。
3. 反應(yīng)板放置的注意事項(xiàng)
無論是水浴還是濕盒溫育,反應(yīng)板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。如果反應(yīng)板疊放,會導(dǎo)致上下層板之間的溫度擴(kuò)散不均勻,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。室溫溫育的反應(yīng),操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指 20~25℃,但具體操作時(shí)可根據(jù)說明書的要求控制溫育。室溫溫育時(shí),ELISA 試劑盒只要平置于操作臺上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn),一個(gè)人操作時(shí),一次不宜多于兩塊板同時(shí)測定,這樣可以更好地控制實(shí)驗(yàn)條件,確保每個(gè)反應(yīng)都能在準(zhǔn)確的溫度和時(shí)間下進(jìn)行。